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實驗原理

利用微球包被不同炎癥因子的捕獲抗體，與小鼠血清中的炎癥因子（如 TNF-α、IL-6、IL-1β）結合；加入熒光標記的檢測抗體后，形成 “微球 - 因子 - 熒光抗體” 復合物，流式細胞術根據熒光強度定量炎癥因子濃度。

操作步驟

1、微球混合：取不同捕獲抗體包被的微球，按比例混合，每孔加入 50μL 混合微球懸液。

2、樣本孵育：加入 50μL 小鼠血清（或梯度稀釋的標準品），室溫避光孵育 1 小時，洗滌 2 次。

3、熒光抗體孵育：加入 50μL 熒光標記的檢測抗體，室溫避光孵育 30 分鐘，洗滌 2 次。

4、流式檢測：用流式細胞儀檢測微球的熒光信號，通過標準曲線計算血清中各炎癥因子的濃度。

應用

1、研究炎癥性疾病（如類風濕關節炎、膿毒癥）模型小鼠的炎癥反應程度；

2、評價抗炎藥物對小鼠血清炎癥因子水平的調節作用。